1. Тънкият пептидогликан слой:Грам-отрицателните бактерии, включително салмонела, имат сравнително тънък слой пептидогликан в клетъчните си стени в сравнение с грам-положителните бактерии. Peptidoglycan е подобен на мрежест полимер, който допринася за силата и твърдостта на клетъчната стена.
2. Външна мембрана:Грам-отрицателни бактерии, включително салмонела, притежават външна мембрана в допълнение към цитоплазмената мембрана. Външната мембрана е уникална характеристика, която отличава грам-отрицателните бактерии от грам-положителните бактерии.
3. Липополизахарид (LPS):Външната мембрана на Salmonella съдържа молекули липополизахарид (LPS). LPS е сложна молекула, състояща се от липиди и полизахариди. Липидната част на LPS, известна като липид А, е отговорна за ендотоксичните свойства на грам-отрицателните бактерии.
Оцветяването с грам включва следните стъпки:
1. Кристално виолетово оцветяване:Всички бактерии са оцветени с кристално виолетово багрило, което навлиза както в грам-положителни, така и в грам-отрицателни бактериални клетки.
2. Йоден разтвор на Грам:йодният разтвор на Грам се добавя като мордант, който помага за стабилизиране на кристално виолетово-йодния комплекс в бактериалните клетки.
3. Стъпка на деколоризация:След това оцветените клетки се третират с алкохол-ацетон деколоризиращ агент. Грам-положителните бактерии запазват кристално виолето-йодния комплекс, докато грам-отрицателните бактерии губят багрилото.
4. CounterStain Safranin:Накрая, деколоризираните грам-отрицателни бактерии са противопоставени със сафранин, който им придава розов или червен цвят.
След като завършат тези стъпки, грам-положителните бактерии изглеждат лилави под микроскопа поради запазената кристална виолетка, докато грам-отрицателните бактерии, включително салмонела, изглеждат розово или червено поради насрещното съдействие.
Като цяло, салмонелата е грамотрицателна поради тънкия си пептидогликан слой, наличието на външна мембрана с липополизахариди (LPS) и отрицателната му реакция към процедурата за оцветяване на грам, което води до розово или червено оцветяване.