1. Сложност на примера :Течната хроматография обикновено е по-малко ефективна за разделяне на сложни проби с голям брой компоненти. Това е така, защото колкото повече компоненти присъстват в пробата, толкова по-трудно става постигането на добро разделяне и разделителна способност.
2. Примерни матрични ефекти :Матрицата на пробата може също да попречи на хроматографското разделяне. Например, ако пробата съдържа високи нива на соли или други нелетливи съединения, те могат да се конкурират с аналитите за свързване към стационарната фаза, което води до лошо разделяне.
3. Претоварване на колони :Ако в колоната се инжектира твърде много проба, това може да претовари неподвижната фаза и да доведе до лошо разделяне. Това е така, защото молекулите на пробата ще се конкурират за места на свързване в стационарната фаза, което води до разширяване на пика и намалена разделителна способност.
4. Състав на подвижната фаза :Съставът на подвижната фаза също може да повлияе на ефективността на течната хроматография. Например, ако подвижната фаза е твърде полярна, това може да доведе до лошо задържане на аналитите върху неподвижната фаза, докато ако подвижната фаза е твърде неполярна, това може да доведе до лошо разделяне на аналитите.
5. Температура :Температурата също може да повлияе на ефективността на течната хроматография. Например, ако температурата е твърде висока, това може да доведе до увеличено разширяване на лентата и намалена разделителна способност, докато ако температурата е твърде ниска, това може да доведе до лоша форма на пика и намалена чувствителност.
6. Апаратура :Качеството на инструментите, използвани за течна хроматография, също може да повлияе на нейната ефективност. Например, ако помпата не е в състояние да осигури постоянен дебит, това може да доведе до лошо разделяне и намалена възпроизводимост. По същия начин, ако детекторът не е достатъчно чувствителен, той може да не успее да открие ниски нива на аналитите.
Чрез разбирането и справянето с тези потенциални ограничения е възможно да се оптимизират техниките за течна хроматография за максимална ефективност.